用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA,所有未發生甲基化的胞嘧啶被轉化為尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不變;隨后設計針對甲基化和非甲基化序列的引物進行PCR。通過電泳檢測MSP擴增產物,如果用針對處理后甲基化DNA鏈的引物能得到擴增片段,則說明該位點存在甲基化;反之,說明被檢測的位點不存在甲基化。
RNA可分為信使RNA、轉運RNA和核糖體RNA三大類,不同組織總RNA提取實質就是將細胞裂解,釋放出RNA,并通過不同方式去除蛋白、DNA等雜質,Z終獲得高純RNA產物的過程。 由于RNA樣品易受環境因素特別是RNA酶的影響而降解,提取高質量的RNA樣品在生命科研中具有相當的挑戰性。RNA提取對樣品的新鮮性要求非常高,獲取樣品后立即提取RNA,若無條件立即實驗,應于-80℃或液氮中。
質粒DNA抽提通常是指從大腸桿菌中進行小量質粒的快速抽提的方法,通過試劑盒采用新型的離子交換柱,在特定條件下,使質粒能在離心過柱的瞬間,結合到質粒純化柱上,在一定條件下又能將質粒充分洗脫,從而實現質粒的快速純化。無需酚氯仿抽提,無需酒精沉淀,12個樣品只需不足30分鐘即可完成。